Mechanizm działania większości leków przeciwnowotworowych oraz związków rakotwórczych polega na ich kowalencyjnym wiązaniu z DNA. Poziom tego wiązania jest zazwyczaj bardzo niski, co powoduje, że potrzebne są niezwykle czułe metody aby kowalencyjna modyfikacja mogła być w ogóle wykryta. My podjęliśmy próbę zastosowania w tym celu prostych, szybkich i sprawdzonych technik inżynierii genetycznej: metody PCR do uzyskania fragmentu DNA o określonej sekwencji nukleotydów, trawienia enzymami restrykcyjnymi oraz elektroforezy w żelach poliamidowych. Kowalencyjna modyfikacja miejsc restrykcyjnych powoduje, że przestają one być substratem dla odpowiedniej restryktazy i nie zachodzi cięcie DNA. Fakt ten można łatwo wykryć po przeprowadzeniu elektroforezy produktu PCR poddanego najpierw reakcji z badanym związkiem, a następnie działaniu enzymów restrykcyjnych. Weryfikację powyższej metody przeprowadzono przy użyciu produktu PCR poddanego reakcji z modelowymi związkami wiążącymi się kowalencyjnie z DNA: cisplatyną oraz CC-1065.
Authors
Additional information
- DOI
- Digital Object Identifier link open in new tab 10.1016/s0003-2697(02)00564-x
- Category
- Publikacja w czasopiśmie
- Type
- artykuł w czasopiśmie z listy filadelfijskiej
- Language
- angielski
- Publication year
- 2003
