Zidentyfikowano i scharakteryzowano białko SSB-podobne, pochodzące z Deinococcus murrayi (DmuSSB). Otrzymany w reakcji PCR fragment zawierający kompletny gen ssb sklonowano w systemie ekspresyjnym Escherichia coli. Gen składa się z 826 nt, kodujących 276 reszt aminokwasowych z wyliczoną teoretycznie masą cząsteczkową monomeru równą 30,14 kDa. DmuSSB zawiera dwie domeny wiążące jednoniciowe DNA OBna monomer I funkcjonuje jako homodimer. W eksperymencie wygaszania naturalnej fluorescencji tryptofanów w białku z poly(dT) DmuSSB wiąże 27-32 nt w zależności od stężenia soli, a fluorescencja była wygaszana w 62%. W eksperymentach badania zdolności komplementacji funkcji EcoSSB in vivo wykazano, że DmuSSB spełnia funkcje EcoSSB. DmuSSB wykazuje 100% aktywności po 120 min. inkubacji w 80°C oraz charakteryzuje się okresem półtrwania wynoszącym 50 min w 95°C, 40 min. w 100°C i 35 min. w 105°C. DmuSSB jest najbardziej termostabilnym białkiem SSB, znanym do tej pory i jest atrakcyjną alternatywą dla TaqSSB i TthSSB w zastosowaniach biologii molekularnej i metodach analitycznych.
Autorzy
Informacje dodatkowe
- Kategoria
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ
- artykuł w czasopiśmie z listy filadelfijskiej
- Język
- angielski
- Rok wydania
- 2007
