DNA digestion with endonucleases sensitive to CpG methylation such as HpaII followed by polymerase chain reaction (PCR) quantitation is commonly used in molecular studies as a simple and inexpensive solution for assessment of region-specific DNA methylation. We observed that the results of such analyses were highly overestimated if mock-digested samples were applied as the reference.We determined DNA methylation levels in several promoter regions in two setups implementing different references: mock-digested and treated with a restriction enzyme that has no recognition sites within examined amplicons. Fragmentation of reference templates allowed removing the overestimation effect, thereby improving measurement accuracy.
Autorzy
- Magdalena Krygier,
- dr inż. Justyna Podolak-Popinigis link otwiera się w nowej karcie ,
- Prof. dr hab. Janusz Limon,
- prof. dr hab. inż. Paweł Sachadyn link otwiera się w nowej karcie ,
- Anna Stanisławska-Sachadyn
Informacje dodatkowe
- DOI
- Cyfrowy identyfikator dokumentu elektronicznego link otwiera się w nowej karcie 10.1016/j.ab.2016.01.020
- Kategoria
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ
- artykuł w czasopiśmie wyróżnionym w JCR
- Język
- angielski
- Rok wydania
- 2016