Gen mutS z termofilnej bakterii Thermus thermophilus zamplifikowano przy użyciu PCR, sklonowano i przeprowadzono jego ekspresję w E. coli. Rekombinantowe białko MutS zawierające oligohistydynową domenę na N-końcu oczyszczono w jednoetapowej procedurze przy wykorzystaniu chromatografii powinowactwaNi(2+). Zdolność do rozpoznania niekomplementarności białka his(6)-MutS potwierdzono w eksperymentach ochrony DNA przed trawieniem egzonukleazą oraz za pomocą retardancji DNA. Wyniki analitycznej filtracji żelowej wskazują, że główną formą MutS z T. therophilus MutS w stężeniu mikromolowym jest tetramer.
Autorzy
Informacje dodatkowe
- Kategoria
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ
- artykuł w czasopiśmie z listy filadelfijskiej
- Język
- angielski
- Rok wydania
- 2003
Źródło danych: MOSTWiedzy.pl - publikacja "Construction and purification of his6-Thermus thermophilus MutS protein." link otwiera się w nowej karcie