Skonstruowano oddzielnie dwie domeny syntazy GlcN-6-P z Candida albicans jako białka fuzyjne, tj. domenę glutaminazową oraz domenę izomerazową, zawierające sekwencje poliHis, odpowiednio na C- i N-końcu. Zoptymalizowano warunki nadekspresji domen w komórkach Escherichia coli. Oba białka oczyszczono do homogenności przy zastosowaniu chromatografii metalopowinowactwa oraz zbadano ich podstawowe właściwości. Wyznaczono parametry kinetyczne reakcji katalizowanych przez te białka. Określono wpływ znanych inhibitorów syntazy GlcN-6-P na aktywność izolowanych domen: DON, FMDP (domena gutaminazowa) oraz ADMP (domena izomerazowa). Stwierdzono, że obie domeny są w pełni funkcjonalne a obecność sekwencji poliHis nie ma wpływu na aktywność enzymatyczną.
Autorzy
Informacje dodatkowe
- Kategoria
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ
- artykuł w czasopiśmie z listy filadelfijskiej
- Język
- angielski
- Rok wydania
- 2004
Źródło danych: MOSTWiedzy.pl - publikacja "Functional domains of Candida albicans glucosamine-6-phosphate synthase." link otwiera się w nowej karcie