Repozytorium publikacji - Politechnika Gdańska

Przedstawiono wyniki badań spektrofluorymetrycznych syntazy GlcN-6-P z Candida albicans oraz enzymu zmutowanego, w którym reszty Trp388 i 690 zostały zamienione na drodze ukierunkowanej mutagenezy na reszty Phe. Metodą spektrofluorymetryczną badano wpływ ligandów: Fru-6-P (substrat), Gln (substrat), UDP-GlcNAc (inhibitor), Glc-6-P (aktywator), DON (analog glutaminy) w odpowiednio dobranych stężeniach. Obecność większości efektorów skutkuje obniżeniem intensywności fluorescencji białek. Jest to skutek zmiany mikrootoczenia reszt Trp na bardziej hydrofilowe. Stwierdzono, że dodatek Gln nie powoduje żadnych zmian w widmie enzymu, co potwierdza wcześniejsze wyniki badań kinetycznych, iż wiązanie substratów przez syntazę GlcN-6-P ma charakter uporządkowany. Wykazano jednoznacznie, że związanie Fru-6-P w centrum aktywnym domeny izomerazowej wywołuje zmiany konformacyjne domeny glutaminowej. Udowodniono również istnienie dwóch różnych miejsc wiązania dla Glc-6-P i Fru-6-P.

Autorzy

• dr hab. inż. Iwona Gabriel link otwiera się w nowej karcie ,
• Jarosław Olchowy link otwiera się w nowej karcie ,
• prof. dr hab. inż. Sławomir Milewski link otwiera się w nowej karcie